1、色谱的定义
色谱法是一种重要的分离分析方法,它利用被分离的物质在互不相溶的两相中分配系数的微小差异进行分离。当两相作相对移动时,使被测物质在两相之间进行反复多次分配,使原来微小的差异累加产生了很大的效果,形成差速迁移,使各组分在柱内移动的同时逐渐分离,以达到分离、分析及测定一些物理化学常数的目的。
将色谱法用于分析中,则称为色谱分析。
--色谱分析是一种分离、分析法
2、色谱的分离原理
当流动相中所携带的混合物流过固定相时,就会和固定相发生作用(力的作用)。由于混合物中各组分在性质和结构上有差异,与固定相发生作用的大小也有差异。
因此,在统一推动力的作用下,不同组分在固定相中的滞留时间有长有短,从而按先后不同的次序从固定相中流出。
3、色谱的分类
(1)按照流动状态分类
1)气相色谱法(GC)
以气体为流动相的色谱法(简称GC),适合分离分析易汽化(-190~500oC范围内有0.2-10mmHg的蒸汽压的)稳定、不易分解、不易反应的物质,特别适用于分析同系物、同分异构体的分离。
2)液相色谱法(LC)
以液体为流动相的色谱(简称LC),适合分离分析高沸点、热不稳定、离子型的样品。
3)超临界流体色谱(SFC)
SFC兼备GC与LC的优势,既可分析气相色谱不适应的高沸点、低挥发性样品,又比高效液相色谱有更快的分析速度和条件。
(2)按固定相的使用形式
按固定相在支持体中的形状分为:
1)柱色谱,将固定相装在色谱柱内,也叫柱层析,将混合物的溶液通过装有吸附剂的层析柱,利用吸附剂对各组分吸附能力的不同,经过洗脱剂的洗脱,将各组分分开的过程。
适用于分析:样品溶解性较好、具有可分离性、样品量至少100mg。如:抗氧剂、防老剂、表面活性剂、增黏树脂、蜡类润滑剂。
2)平板色谱
平板色谱包含纸色谱(用滤纸做固定相或固定相载体的色谱)和薄层色谱(固定相均匀涂在塑料板或玻璃板上)。
纸色谱的原理类似于薄层色谱,是一种吸附--解吸附--再吸附--解吸附的过程,从而达到各成分的互相分离。
薄层色谱:利用吸附剂(硅胶)对样品中各组份吸附能力不同,及展开剂对他们的解吸能力不同,使各组份达到分离的目的。
特点:微量、快速、简单、节省
一般极性的化合物:用PE/EA 体系
极性较大的化合物:用DCM/MeOH体系
3)按分离效率
分为经典液相色谱和高效液相色谱。